日本国内の大学・社会人連盟（JAFA）や高校アメフト、そして本場アメリカのNCAAやNFLに至るまで、マウスピースに関する競技規則は極めて細かく定められています。基本原則として「プレー中は完全に口内へ装着されていること」が義務であり、マウスピースを口からブラブラと出していたり、ベンチに置き忘れてフィールドに入ったりした場合は審判からイエローフラッグを投じられます。
特に厳格にチェックされるのがアメフトのマウスピースの色規定です。日本の学生連盟やNCAAなどの公式規則では、フィールド上の審判が装着の有無を一目で確認できるよう、「白および透明（クリア）」のマウスピースの使用が禁止されています。黄色、赤、青、黒といった鮮やかな有色マウスピースを選ばなければ公式戦に出場できません。
また、ヘルメットのフェイスマスクに固定するストラップ付きマウスピースの着用を義務付けているカテゴリーも多く存在します。NFLではデザインの自由度が比較的高いものの、過度なメッセージロゴや規定違反カラーに対しては高額な罰金や即時交代処分が科されるなど、規律の徹底が図られています。
